1. darbība. Neattīrīto Melanotan I peptīdu izšķīdina 100 ml attīrīta ūdens un filtrē maisījumu caur 0,45 μm membrānu, lai iegūtu neapstrādāta peptīda šķīdumu.
2. darbība. Attīriet neapstrādātu melanotāna I peptīdu, izmantojot augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfiju (HPLC). Izmantojiet DAC-HB50 dinamiskās aksiālās kompresijas kolonnu ar gradienta eluēšanas procesu, izmantojot mobilo fāzi A (0,05 mas.% trifluoretiķskābi ūdenī) un mobilo fāzi B (0,05 mas.% trifluoretiķskābi acetonitrilā). Pārraugiet paraugu, izmantojot UV detektoru, un savāciet peptīda šķīdumu, kas atbilst mērķa maksimumam.
3. darbība: pēc HPLC attīrīšanas iegūstiet 180 ml Melanotan I trifluoracetāta šķīduma, kura tīrība pārsniedz 99%; Koncentrējiet to ar rotācijas iztvaicēšanu, lai iegūtu 50 ml šķīduma.
Step 4: Equilibrate the chromatography column with deionized water and load the sample (50 mL of the Melanotan I trifluoroacetate solution with >99% tīrība). Elutē 50 minūtes, izmantojot 2% ūdens etiķskābes sistēmu. Koncentrējiet savākto mērķa produktu līdz 80 ml, izmantojot rotācijas iztvaicēšanu, pēc tam pakļaujiet to pirms-liofilizācijas un liofilizācijas procesiem. Visbeidzot iegūstiet 5,33 g augstas -tīrības pakāpes Melanotan I peptīda, kas veido 32,33% iznākumu.